5—羥甲基糠醛（5—Hydroxymethyl furfural，簡稱(cheng)5—HMF）是葡萄糖(tang)等(deng)單糖(tang)化(hua)合(he)物(wu)(wu)在高溫或(huo)弱(ruo)酸(suan)等(deng)條件下脫(tuo)水產生(sheng)的(de)一個醛類化(hua)合(he)物(wu)(wu)。該化(hua)合(he)物(wu)(wu)穩定性不好，容易分(fen)解成(cheng)乙酰丙酸(suan)和甲酸(suan)，或(huo)發生(sheng)聚(ju)(ju)合(he)反應。一方面，5—HMF對人體橫紋肌和內臟有損害；另一方面，葡萄糖(tang)注射(she)(she)液在高溫情(qing)況下顏色容易變黃(huang)，雖(sui)然(ran)5—HMF本(ben)身無色，但由于5—HMF可發生(sheng)聚(ju)(ju)合(he)而(er)由聚(ju)(ju)合(he)物(wu)(wu)導致變色，且(qie)葡萄糖(tang)注射(she)(she)液顏色的(de)深淺與5—HMF產生(sheng)量成(cheng)正(zheng)比。

    　5—HMF的(de)(de)量可(ke)指(zhi)代產品中(zhong)葡(pu)萄(tao)(tao)(tao)糖(tang)的(de)(de)分(fen)解程度，葡(pu)萄(tao)(tao)(tao)糖(tang)有α—葡(pu)萄(tao)(tao)(tao)糖(tang)和β—葡(pu)萄(tao)(tao)(tao)糖(tang)兩(liang)個異構(gou)(gou)體，它們與鏈式結構(gou)(gou)A存在(zai)平(ping)衡，通過鏈式結構(gou)(gou)A可(ke)生(sheng)成大量的(de)(de)四氫呋(fu)喃類物質。經過脫水反應后生(sheng)成 5—羥(qian)(qian)甲基糠(kang)(kang)醛， 5—羥(qian)(qian)甲基糠(kang)(kang)醛受熱后再生(sheng)成 5—甲基糠(kang)(kang)醛、糠(kang)(kang)醛和其(qi)它呋(fu)喃類物質。因此(ci)，糠(kang)(kang)醛、 5—甲基糠(kang)(kang)醛和 5—羥(qian)(qian)甲基糠(kang)(kang)醛是葡(pu)萄(tao)(tao)(tao)糖(tang) 主(zhu)要裂解產物。5—羥(qian)(qian)甲基糠(kang)(kang)醛含量指(zhi)標控制為小于300ppm。

    　1 試劑(ji)

    　乙酸乙酯、乙腈 、乙酸、乙酸鹽緩沖液、標準品：5—羥甲基糠醛純度＞99%、5—羥甲基糠醛標準儲備液、5—羥甲基糠醛標準工作液。
    　1.1 冰醋酸（分析純）；
    　1.2 乙酸乙酯（分析純）；
    　1.3 乙腈：色譜純  一級品  含量>99.9%；
    　1.4 醋酸溶液：c（CH3COOH）=0.2mol/L；
      1.5 醋酸鈉溶液：c（CH3COONa）=0.2mol/L；
    　1.6 醋酸鹽緩沖溶液（pH=4.00）：醋酸水溶液：醋酸鈉水溶液=164：36（v/v）；
    　無水(shui)碳酸(suan)鈉溶(rong)液(ye)：c（Na2CO3）=14g/L。

圖譜1

峰參數1

圖譜2

峰參數2

    　2 檢驗步驟

    　2 .1試(shi)樣溶液的制備：

　　稱取試樣(yang)4. 8g―5. 2g，置(zhi)于(yu)125ml的心形(xing)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)中，用(yong)約25ml蒸(zheng)餾水(shui)稀(xi)釋(shi)，然后加入(ru)(ru)30ml乙(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)酯(zhi)(zhi)振蕩5min，靜置(zhi)分層。將水(shui)層放入(ru)(ru)另(ling)一個(ge)心形(xing)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)中，用(yong)30ml乙(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)酯(zhi)(zhi)重復萃取兩次，棄去(qu)水(shui)層，合并三次乙(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)酯(zhi)(zhi)萃取液(ye)(ye)(ye)于(yu)另(ling)一心形(xing)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)中，再加入(ru)(ru)10ml碳酸(suan)(suan)(suan)鈉水(shui)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)立即振蕩，靜置(zhi)分層（此凈化操(cao)作(zuo)應在(zai)(zai)新聞稿件來源(yuan)地華夏銀行酒報(bao)2min內完成）。再用(yong)20ml乙(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)酯(zhi)(zhi)提(ti)取碳酸(suan)(suan)(suan)鈉水(shui)層一次。棄去(qu)碳酸(suan)(suan)(suan)鈉水(shui)層，合并乙(yi)(yi)(yi)酸(suan)(suan)(suan)乙(yi)(yi)(yi)酯(zhi)(zhi)提(ti)取液(ye)(ye)(ye)，并加入(ru)(ru)9滴冰(bing)醋(cu)酸(suan)(suan)(suan)，全部轉移至旋轉蒸(zheng)發(fa)器內，于(yu)40℃―45℃下，蒸(zheng)至剩余溶(rong)液(ye)(ye)(ye)約為(wei)1ml―2ml時(shi)，卸下心形(xing)瓶(ping)(ping)(ping)(ping)，在(zai)(zai)40℃下用(yong)氮氣吹干(gan)，用(yong)1ml醋(cu)酸(suan)(suan)(suan)鹽緩沖(chong)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)溶(rong)解殘留物(wu)，用(yong)帶有(you)0.45μm水(shui)系濾(lv)膜的針頭式(shi)過濾(lv)器濾(lv)入(ru)(ru)樣(yang)品瓶(ping)(ping)(ping)(ping)，作(zuo)為(wei)試樣(yang)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)。如果試樣(yang)溶(rong)液(ye)(ye)(ye)不(bu)能及時(shi)測試時(shi)，應先存放在(zai)(zai)冰(bing)箱中冷藏，但(dan)不(bu)得超過48小(xiao)時(shi)。

    　2 .2  5—羥甲基糠醛標準儲備液配制：
　　稱取10mg的羥甲基(ji)糠醛，用乙酸鹽緩沖溶液稀釋成100ug/ml的標準儲(chu)備液。

    　2 .3  5—羥甲基糠醛標準工作液配制：
　　將上述標準(zhun)儲(chu)備液(ye)再(zai)用乙(yi)酸鹽緩沖溶液(ye)配制成濃(nong)度為10ug/ml標準(zhun)工作(zuo)液(ye)。

    　3 儀器
    　美國戴安(an)公司生產(chan)ICS300離子色譜(pu)，Ultimate3000 varible waveleng detector紫外(wai)檢測(ce)器。旋轉(zhuan)蒸發儀、一(yi)次性濾膜(mo)0.45um 、1ml—5ml、5ml—10ml加(jia)樣(yang)槍，色譜(pu)柱(zhu)Diamonsil5uc18　250×4.6mm，美國密理博公司生產(chan)的Direct—Q3超(chao)純(chun)水機。

    　4 色譜條件
    　ICS300離子色譜、紫外檢測器、5uc18  250×4.6mm色譜柱。
    　流動相: 乙腈：水=10：90（v/v）；
    　流速： 1.0ml/min；
    　柱溫：35℃；
    　檢測波長： 276nm；
    　進樣體積： 10μl；
    　保留時間：羥甲基糠醛5.2min。
    　上述操作(zuo)參(can)數可根據儀(yi)器情(qing)況對給定的(de)參(can)數做適當(dang)的(de)調(diao)整，以期獲得最佳效果。

    　5 色譜測定
    　準(zhun)確注射(she)10uL樣(yang)液(ye)于離子色(se)譜(pu)儀(yi)中，進(jin)行分析，響應值(zhi)均在儀(yi)器(qi)檢測(ce)的線性范圍內。對標(biao)準(zhun)工(gong)作液(ye)和樣(yang)液(ye)等體積參插進(jin)樣(yang)測(ce)定，以(yi)外標(biao)法定量(liang)。在色(se)譜(pu)條(tiao)件下(xia)，5—羥甲基糠醛保留(liu)時間5. 2分鐘左右(you)。

    　從上述分析情(qing)況來看(kan)，果(guo)汁中(zhong)5—羥甲基(ji)糠醛(quan)的(de)含量很(hen)低(di)。主要是要在果(guo)汁的(de)壓榨工(gong)藝過程中(zhong)，在高(gao)溫或弱酸條(tiao)(tiao)件下(xia)脫水等工(gong)藝條(tiao)(tiao)件及衛生條(tiao)(tiao)件的(de)嚴(yan)格控制(zhi)下(xia)，最大程度上降低(di)5—羥甲基(ji)糠醛(quan)成分的(de)產生。